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elisa試劑盒白介素類封閉要*
更新時間:2018-03-28   點擊次數(shù):1282次

  elisa試劑盒白介素類檢測抗體多用間接型elisa。以純化抗原包被載體,經(jīng)4℃過夜,以無關(guān)蛋白封閉至少2小時以上,加入待測樣品,室溫孵育1小時,洗滌干凈后加酶標抗體,再經(jīng)室溫孵育、洗滌后,以底物顯色,顯色到一定程度終止反應(yīng),在酶標儀上讀結(jié)果或以肉眼判斷。
   類型:elisa具體方法的類型繁多,試劑的標準化問題還未zui后解決,溫育的時間、溫度、洗滌液的種類及洗滌次數(shù)等都是影響測定的因素。但參考以上基本過程,無論怎樣變化,均離不開抗原-抗體反應(yīng)、酶標抗體的免疫學反應(yīng)及酶催化作用。
   特點:1、敏感性高,可檢出濃度在ug~mg/ml水平;2、特異性強;3、重復性好;4、快速、簡便、廉價。
實驗條件
   固相載體:可作為固相載體的物質(zhì)很多,如:纖維素、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、聚丙烯、交聯(lián)葡聚糖、玻璃、硅橡膠、瓊脂糖凝膠等。可以各種形式出現(xiàn);試管、微量反應(yīng)板凹孔、小珠.....。zui常用的是聚苯乙烯制品,其吸附性。固相包被的機制一般不外乎物理吸附和共價交聯(lián),
封閉:以無關(guān)蛋白占據(jù)載體上未被包被的空隙,常用的封閉液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清。
待測樣品:稀釋度要合適,濃度太大會發(fā)生非特異性吸附造成假陽性,過分稀釋會影響抗原-抗體之間的免疫學反應(yīng)。選擇zui適稀釋度,在實驗體系中取光密度在1.0左右的稀釋度為宜。
酶結(jié)合物:使用高質(zhì)量的酶結(jié)合物是elisa成功的關(guān)鍵。
  elisa試劑盒白介素類注意事項
    酶聯(lián)免疫技術(shù)的試劑標準化問題尚未完*,溫育過程的時間、溫度、洗滌液的種類及洗滌次數(shù)都是影響zui后測定的因素。為使實驗得到滿意的結(jié)果,在操作過程中應(yīng)作到
1、每次試驗都必須設(shè)陽性和陰性對照。
2、封閉要*。
3、洗滌要測定。
200mg        137-08-6    泛酸鈣標準品
200mg        1400-61-9     制霉菌素標準品
200mg        151006-14-3     普伐他汀1,1,3,3-四甲基氨基丁烷標準品
200mg        1707-14-8     鹽酸芬美曲秦標準品
200mg        1808-12-4    溴馬秦標準品
200mg        191217-81-9     普拉克索鹽酸鹽標準品
200mg        23313-80-6    差向四環(huán)素標準品
200mg        25086-15-1     甲基丙烯酸共聚物C型標準品
200mg        25086-15-1     甲基丙烯酸共聚物B型標準品
elisa試劑盒白介素類

 

 

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